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黑龙江省鹅副粘病毒病的分离与鉴定

2020-02-10 17:10:00  养鸭网    广告投放 软文投稿
先做细菌学检查,然后按 1:5 常规处理后,取上清液,接种 9 日龄 SPF 鸡胚, 37 ℃ 孵化 36-72h ,待鸡胚死亡后,置 4 ℃ 冰箱过夜,收取尿囊液和绒毛尿囊膜连传三代,并观察胚体,全身充血呈鲜红色,尤以背、胸、头部出血显著。 2测定 用 F 3 代尿囊液按 1:10 倍比稀释后,接种 9 日龄 SPF 鸡胚,每稀释度接种 6 枚,并设对照。连续观察 5 天,统计死亡数,按 Reed-Muench 法计算。 3病毒纯化和电镜观察 取
雏鹅新发病毒性肠炎的症状及预防措施3 ~ 7天,无早期症状,常倒在地上,昏睡中死亡,病程1天。急性型:雏鹅新型病毒性肠炎多发生在8 ~ 15日龄的雏鹅雏鹅,表现为抑郁、孤独、嗜睡、不进食、饮水、腹泻、淡黄色、绿色、灰色和白色大便,常混有气泡和臭味。病鹅呼吸困难,少量的浆液从鼻孔流出(1)免疫:种鹅产蛋前注射雏鹅新病毒性肠炎~ 小鹅瘟双减毒疫苗进行二次免疫,可使后代雏鹅在5 ~ 6个月内获得母源抗体保护。在雏鹅方法预防新病毒性肠炎最有...

一、1病原分离

将病死鹅肝、脾、胰等组织,先做细菌学检查,然后按1:5常规处理后,取上清液,接种9日龄SPF鸡胚,37℃孵化36-72h,待鸡胚死亡后,置4℃冰箱过夜,收取尿囊液和绒毛尿囊膜连传三代,并观察胚体,全身充血呈鲜红色,尤以背、胸、头部出血显著。

2测定

用F3代尿囊液按1:10倍比稀释后,接种9日龄SPF鸡胚,每稀释度接种6枚,并设对照。连续观察5天,统计死亡数,按Reed-Muench法计算。

3病毒纯化和电镜观察

取F3代尿囊液,经过高速离心,超速离心,等密度蔗糖梯度离心后收取目标区带,经磷钨酸负染后,在东北农业大学电镜室电镜观察。

4免疫保护试验

用本站研制的灭活疫苗接种11~19日龄的鹅、鸭进行免疫,3周后攻毒,攻毒株为F3代尿囊液1:200稀释后0.1ml/羽,并测定免疫前后抗体滴度,观察保护情况。

5血清学检查

对1999年以来我省十个鹅场的208份鹅血清,进行新城疫和禽流感血清学抗体检测。

二、1鹅副粘病毒病的流行特点调查结果

发病最小的仅3日龄,最大的为300余日龄。发病率为16-100%,平均为32%,其中15日龄以内雏鹅的发病率和死亡率可以达到100%。发病鹅群日龄越小对本病越敏感(发病率和死亡率越高),而且病程短、很少康复。临床特点主要是腹泻。患病鹅排灰白色或黄色、暗红色、绿色、墨绿色水样稀便,体重迅速减轻。10日龄左右病鹅有甩头、咳嗽等呼吸道症状。病变特点为典型症状为肠粘摸纤维性坏死。肠粘摸有灰白色或淡黄色芝麻粒大到小蚕豆大纤维性坏死结痂,剥离后为出血性溃疡。脾脏肿大有散在的从芝麻粒大到绿豆大小的灰白色坏死灶。胰脏肿大有灰白色坏死灶。部分病鹅的腺胃及肌胃充血出血。脑充血郁血,心肌变性。肝脏肿大瘀血,质地较硬,有数量不等大小不一的坏死灶。

2病原分离

细菌检查结果,鹅肝、脾分别接种绵羊鲜血培养基作嗜氧和厌氧培养均为阴性,肝、脾作组织触片用姬姆萨和革兰氏染色镜检,均未见细菌。从尿囊腔接种第一代就分离到病毒,经三代后其死亡时间稳定在36~48小时,死亡胚体充血和出血明显。分离毒能凝集鸡红细胞(见表1)。

3分离毒与ND阳性血清的HI价为210,与AI阳性血清的AGP为阴性。病鹅血清与ND抗原的HI价为27,与AI抗原的AGP为阴性。分离毒不能被禽流感标准阳性血清(H5、、H9)抑制。分离毒与病鹅血清的HI价为211。

4电镜观察可见病毒颗粒呈大小不一形态不正的多形性,有囊膜,病毒颗粒大小平均直径在120nm左右。

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肠道黏膜上有灰白色或淡黄色芝麻粒至小蚕豆大纤维素性坏死性结痂;十二指肠黏膜充血、出血;小肠黏膜发炎,有坏死灶;腺胃乳头出血,肌胃角质膜易剥离,并且角质膜下有出血点;肝、脾、肾都有不同程度的肿大、充血等;胰脏肿胀,表面有灰白色坏...
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